Descrição geral da seleção de colunas
Material de base
- A sílica é o material de base mais popular. Possui uma elevada resistência física e uma superfície facilmente modificada quimicamente para tornar as fases adequadas para utilização numa ampla gama de modos de HPLC. No entanto, a sílica dissolve-se em água com um pH ≥ 6,5, ao passo que as sílicas ligadas são propensas a ser instáveis num pH ≤ 2,5 . As sílicas ligadas mais recentes podem ter um intervalo de pH alargado de 2 -10 ou superior. Entre as inovações mais recentes, contam-se a gama de sílica TIPO-C™, cuja superfície é modificada com uma camada de hidreto de silício
- Os materiais poliméricos têm restrições de pH mínimas, mas são fisicamente menos estáveis e apresentam eficiências de separação inferiores às da sílica para pequenas moléculas. No que respeita a moléculas grandes, como as proteínas ou os polímeros sintéticos, o seu desempenho é equivalente ao de materiais à base de sílica.
- O carbono grafitado tem uma resistência elevada e uma excelente estabilidade de pH, mas não pode ser modificado. Pode ser caro e é mais adequado para aplicações de seletividade única.
- O dióxido zircónio (ZrO2) tem a vantagem da seletividade única combinada com uma extraordinária estabilidade química e térmica (até 200 °C)
- O dióxido de titânio (TiO2) é estável num amplo intervalo de pH e em temperaturas elevadas. Ao contrário da sílica, a superfície do dióxido de titânio é alcalina, o que pode revelar-se útil na análise de medicamentos básicos, mas as eficiências de separação são geralmente inferiores
- A alumina possui uma estabilidade de pH maior do que a sílica, mas não pode ser quimicamente modificada facilmente
Modo de separação
Em poucas palavras, a seleção do modo adequado de separação cromatográfica é pautado pela polaridade e o tamanho molecular do soluto. Abaixo apresentamos um guia de seleção sucinto. Para algumas moléculas, poderá ser adequada mais do que uma técnica.
